中医中药研究中实验动物的选择
中医中药研究中实验动物的选择
中医中药的研究由经验进入了实验研究阶段,已建立了:“阳虚”、“阴虚”、“脾虚”、“脉微欲绝”、“血虚”、“血瘀”、“肝郁”、“寒证”、“热证”、“温病”及“里实”等11种动物实验模型。其造型的思路和方法除个别者外,均是选择一些造成与临床证型相仿的致病因素,作用于动物机体使其产生类似临床某些证的模型。
中医证型动物模型造型方法:
1. “卫气营血”模型:选用家兔, 体重2.1~2.75kg。用强毒力的大肠杆菌以0.75ml(每ml含大肠杆菌27亿)/kg体重,注射至兔耳缘静脉造型。感染后动物表现圈缩、懒动、少食、体温升高、心率增快、耳血管周围渗血、出血;舌象有明显病理改变;血培养有大肠杆菌生长,白细胞及血小板显著减少。可100%造型成功。
2. “寒证、热证”模型:选用雌性大鼠,体重170~210g。热证型:用温热药(附子、干姜、肉桂、党参、黄芪、白术)制成100%水煎剂灌胃,每次2ml,每日2次。寒证型:首先于腹腔内注射三联疫苗1ml,每日1次共2次;然后给予寒冷药(胆草、黄连、黄柏、银花、连翘、石膏)制成的100%水煎剂灌胃,每日2次,每次2ml。给药后15天60-70 %造型成功。热证型:心率加快,饮水量增多,尿内儿茶酚胺及17- 羧皮质类固醇排出量增多。寒证型:心率减慢,尿内儿茶酚胺及17-羧皮质类固醇排出量减少。 用此模型可测量痛阈和惊厥阈值及脑内介质;观察动情周期及血内孕酮含量。
3. “血瘀”模型:高粘滞血症模型:选用家兔,耳缘静脉注入10 %葡萄糖生理盐水,每公斤体重注入5ml,可100%造型成功。给药后可见微循环血流变慢,红细胞聚集,全血及血浆粘度增加,血沉快,红细胞电泳变慢。此模型适用于“活血化瘀”药物作用原理的研究。
4. “血虚”模型:选用雄性大鼠,体重180~250g。于实验第1、4、7天皮下注射2%乙酰基苯肼(Acety-Phenyhydrazine,APH)生理盐水溶液,以每100g 体重计, 第一次1ml,第2、3次0.5ml。给药后可形成实验性溶血性贫血。红细胞与血红蛋白减少,出现大量海氏(Heine)小体。可维持9~14天。此模型适用于血虚与气虚药物的研究。
5. “脾虚”模型:选用雄性大鼠,以大黄、玄明粉、旋明粉水煎剂和大黄、番泻液灌胃给药,给药后动物发生腹泻、消瘦、食量下降、精神不振,毛发欠光泽,基本符合临床脾虚病人症状。
6. “肝郁”模型:选用大鼠和小鼠。小鼠腹腔注射艾叶注射液0.6ml(含生药0.3g),每日1次,分别于45天及60天处死。大鼠腹腔注射艾叶注射液2ml(含生药2.0g)每日1次,半月后改为隔日1次40天处死。艾叶中毒后动物易激怒,好斗,咬人,进食量少,体重增加慢。小鼠:肝脏有灶性坏死,以60天组较45天组为重。大鼠:肝细胞肿胀,胞浆疏松出现颗粒,门区有嗜酸性细胞浸润,中央静脉充血。
中医证型动物模型造型方法:
1. “卫气营血”模型:选用家兔, 体重2.1~2.75kg。用强毒力的大肠杆菌以0.75ml(每ml含大肠杆菌27亿)/kg体重,注射至兔耳缘静脉造型。感染后动物表现圈缩、懒动、少食、体温升高、心率增快、耳血管周围渗血、出血;舌象有明显病理改变;血培养有大肠杆菌生长,白细胞及血小板显著减少。可100%造型成功。
2. “寒证、热证”模型:选用雌性大鼠,体重170~210g。热证型:用温热药(附子、干姜、肉桂、党参、黄芪、白术)制成100%水煎剂灌胃,每次2ml,每日2次。寒证型:首先于腹腔内注射三联疫苗1ml,每日1次共2次;然后给予寒冷药(胆草、黄连、黄柏、银花、连翘、石膏)制成的100%水煎剂灌胃,每日2次,每次2ml。给药后15天60-70 %造型成功。热证型:心率加快,饮水量增多,尿内儿茶酚胺及17- 羧皮质类固醇排出量增多。寒证型:心率减慢,尿内儿茶酚胺及17-羧皮质类固醇排出量减少。 用此模型可测量痛阈和惊厥阈值及脑内介质;观察动情周期及血内孕酮含量。
3. “血瘀”模型:高粘滞血症模型:选用家兔,耳缘静脉注入10 %葡萄糖生理盐水,每公斤体重注入5ml,可100%造型成功。给药后可见微循环血流变慢,红细胞聚集,全血及血浆粘度增加,血沉快,红细胞电泳变慢。此模型适用于“活血化瘀”药物作用原理的研究。
4. “血虚”模型:选用雄性大鼠,体重180~250g。于实验第1、4、7天皮下注射2%乙酰基苯肼(Acety-Phenyhydrazine,APH)生理盐水溶液,以每100g 体重计, 第一次1ml,第2、3次0.5ml。给药后可形成实验性溶血性贫血。红细胞与血红蛋白减少,出现大量海氏(Heine)小体。可维持9~14天。此模型适用于血虚与气虚药物的研究。
5. “脾虚”模型:选用雄性大鼠,以大黄、玄明粉、旋明粉水煎剂和大黄、番泻液灌胃给药,给药后动物发生腹泻、消瘦、食量下降、精神不振,毛发欠光泽,基本符合临床脾虚病人症状。
6. “肝郁”模型:选用大鼠和小鼠。小鼠腹腔注射艾叶注射液0.6ml(含生药0.3g),每日1次,分别于45天及60天处死。大鼠腹腔注射艾叶注射液2ml(含生药2.0g)每日1次,半月后改为隔日1次40天处死。艾叶中毒后动物易激怒,好斗,咬人,进食量少,体重增加慢。小鼠:肝脏有灶性坏死,以60天组较45天组为重。大鼠:肝细胞肿胀,胞浆疏松出现颗粒,门区有嗜酸性细胞浸润,中央静脉充血。
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